Алексей Соколов » Публикация

Аннотация В данной работе исследовано образование комплексов церулоплазмина (CP) с белками семейства серпроцидинов: азуроцидином (CAP37), нейтрофильной эластазой (NE), катепсином G (CG) и протеиназой 3 (PR3). Ранее мы показали, что эти белки сорбируются при аффинной хроматографии белкового экстракта из лейкоцитов человека на иммобилизованном CP. В настоящей работе мы наблюдали, что при гель-фильтрации серпроцидины формируют комплексы с CP в молярном соотношении 1:1. Ингибитор сериновых протеиназ PMSF не препятствовал взаимодействию серпроцидинов с CP при диск-электрофорезе без детергентов. CP влиял на активность NE, CG и PR3 как обратимый конкурентный ингибитор c Ki ~ 1 мкМ. Ингибирующий эффект CP зависел от ионной силы раствора и практически отсутствовал при концентрации NaCl выше 300 мМ. Серпроцидины угнетали оксидазную активность CP в отношении п-фенилендиамина как обратимые конкурентные ингибиторы. Наибольшее влияние при этом оказывал CAP37 (Ki ~ 20 нМ. При добавлении разных серпроцидинов к плазме крови человека, крысы, мыши, кролика, дельфина, собаки, лошади и коровы только САР37 образовывал комплекс с СР. Синтетический пептид RKARPRQFPRRR (5-13,61-63 CAP37) вытеснял CAP37 из комплекса с CP. Добавление CAP37 к тройному комплексу CP с лактоферрином и миелопероксидазой вызывало вытеснение последней из комплекса с CP. Константа диссоциации CAP37 с иммобилизованным CP составила 13 нМ. Таким образом, специфическим партнером CP среди серпроцидинов является CAP37.