Бюллетень медицинских Интернет-конференций » Архив номеров » Volume 3, issue 3 » Публикация
Опубликовано
2013-03-03
Опубликовано на SciPeople2013-03-03 23:21:33
ЖурналБюллетень медицинских Интернет-конференций
Определение геометрических размеров тромбоцитарных агрегатов in vitro методом цифровой микроскопии
Дубровский В.А., Забенков И.В., Торбин С.О. Определение геометрических размеров тромбоцитарных агрегатов in vitro методом цифровой микроскопии // Бюллетень медицинских Интернет-конференций, Vol. 3, Issue 3, 2013, pp. 645-645
Аннотация
Экспериментально демонстрируются возможности метода цифровой микроскопии (МЦМ) для регистрации агрегации тромбоцитов плазмы крови in vitro на примере взаимодействия плазмы с индуктором АДФ. Разработанная компьютерная программа для анализа цифровых изображений позволила определять площадь регистрируемых тромбоцитарных агрегатов, их эффективные размеры, средние размеры при различных условиях экспериментов, а также распределение агрегатов по размерам. Проведен анализ зависимости этих параметров тромбоцитарных образований от соотношения объемов взаимодействующих компонент «плазма-индуктор», причем как для образцов плазмы с нормальным содержанием тромбоцитов, повышенной их концентрацией, а также для случаев тромбопении и образцов плазмы со слабой агрегационной активности тромбоцитов.Показано, что практически независимо от свойств исследуемой плазмы средние величины эффективных диаметров тромбоцитарных агрегатов пробы плазмы в основном составляют 8-12 мкм. В то же время в случаях тромбоцитоза, а также в норме могут образовываться агрегаты со средними эффективными диаметрами вплоть до 100 мкм. С другой стороны тромбоцитопения приводит к снижению размеров тромбоцитарных агрегатов примерно до 24 мкм, а тромбоцитопатия - до 16 мкм. Эксперименты показали, что МЦМ обладает высокой чувствительностью: он позволяет регистрировать агрегаты, состоящие всего лишь из нескольких тромбоцитов. В то же время для этого метода характерен большой динамический диапазон – он способен регистрировать как малые агрегаты, так и те, которые включают в себя сотни клеток.Представляется, что наиболее чувствительным параметром агрегатов к состоянию исследуемой плазма в отношении ее агрегационной активности является площадь, занимаемая агрегатом на фото изображении. Это показано экспериментально и, в то же время, довольно понятно: площадь пропорциональна квадрату размера агрегата, поэтому небольшие изменения размера агрегата приводят к значительным изменениям его площади. Поэтому именно площадь агрегата может быть принята за меру, несущую информацию об агрегационной активности исследуемой плазма.Важно заметить, что все известные агрегометры, независимо от физических принципов, лежащих в основе их действия, являются косвенными измерительными устройствами. Предложенный здесь метод регистрации и исследования агрегации тромбоцитов плазмы, основанный на цифровой микроскопии, является прямым методом. По нашему мнению он мог бы рассматриваться как эталонный, он мог бы служить для сравнения и калибровки иных методов.